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目錄

2.1 蛋白免疫印跡
蛋白免疫印跡(Western Blot )技術主要是利用電泳技術(SDS-PAGE)區分不同大小的蛋白,然后轉移至固相支持物(PVDF膜,NC膜等)上,再根據抗原抗體的特異性結合原理,通過化學發光或呈色等技術檢測蛋白的表達。
2.2 免疫共沉淀
免疫共沉淀(Co- Immunoprecipitation, Co-IP)是利用抗原和抗體的特異性結合以及細菌的Protein A或G特異性地結合到免疫球蛋白的Fc片段的現象開發出來的方法。
2.3 酵母雙雜交系統
酵母雙雜交系統(yeast two-hybrid system)是在酵母體內分析蛋白質-蛋白質相互作用的基因系統,也是一個基于轉錄因子模塊結構的遺傳學方法。該方法建立以來,經過不斷的完善和發展,不但可以檢測已知蛋白質之間的相互作用,更重要的在于發現新的與已知蛋白相互作用的未知蛋白。
2.4 染色質免疫沉淀技術
染色質免疫沉淀技術(chromatin Immunoprecipitation assay, ChIP)研究體內DNA與蛋白質相互作用的方法。
2.5 GSTpull-down實驗
GST pull-down實驗是一個行之有效的驗證酵母雙雜交系統的體外試驗技術。其基本原理:將靶蛋白-GST融合蛋白親和固化在谷胱甘肽親和樹脂上,作為與目的蛋白親和的支撐物,充當一種“誘餌蛋白”,目的蛋白溶液過柱,可從中捕獲與之相互作用的“捕獲蛋白”(目的蛋白),洗脫結合物后通過SDS-PAGE電泳分析,從而證實兩種蛋白間的相互作用或篩選相應的目的蛋白。
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